核酸引物是指人工合成的两段寡核苷酸序列，一段与目的基因一端的一条DNA模板链互补，另一段与目的基因另一端的另一条DNA模板链互补。它是DNA复制开始时DNA聚合酶的结合位点，所以引物的纯度关系到PCR扩增的结果，尤其是对用于测序、克隆的引物。因此引物合成之后一般都需要做进一步的纯化。

核酸引物纯化

核酸引物纯化现在引物纯化方式有很多种,目前常见的主要有C18柱脱盐、RPC纯化、ePAGE纯化、PAGE纯化以及HPLC纯化等，各纯化方式对比如下。

在使用HPLC方法对引物DNA的分析和纯化中，常用的有离子交换（ion-exchange）HPLC和反相HPLC。反相HPLC一般纯度能大于90%；离子交换 HPLC纯度能大于95%，并且可以有效的去除N-1短片段，对纯化短链引物＜15mer特别有效。

精东黄色视频最近推出的核酸纯化系统，是一套多功能制备系统，流量范围可达100mL/min，同时具备双波长检测功能，可实现进样和收集同时进行，兼容多种规格托盘和试管。与之相匹配的SinoPak BEH T-C18 反相色谱柱以及Bioassist 阴离子交换柱，纯化效率高，色谱柱寿命长，是核酸纯化的不二之选。

核酸引物纯度检测

纯化完成后，引物纯度检测也是必备的一个步骤。HPLC是最常用的一种分析方法，参考国标GB/T 34797-2017，核酸引物纯度的分析色谱条件如下：

色谱柱：SinoPak BEH AQ-C18 色谱柱 3μm 4.6*50mm

流动相：A：0.1mol/L TEAA；B：乙腈，梯度洗脱

0-15min 流动相B从5%到30%

检测波长：260nm

流速：1.0mL/min

柱温：60℃

SinoPak BEH AQ-C18色谱柱是精东黄色视频最新研发并推出的全新一代杂化硅胶色谱柱，通过特殊的三键键合工艺，极大降低键合相脱落。该色谱柱不但可以耐纯水，在具备高的柱效和机械强度的同时，还具有很宽pH范围稳定性，即使在极端的条件下，也能保持很好的柱寿命。SinoPak BEH AQ-C18色谱柱有三种不同的孔径[130Å、200Å和300Å] ，适用于从小分子分析到大分子生物制药分析的各类应用。

分析纯化系统配置如下