液相色谱柱是液相色谱分析系统的核心部件，实验结果准不准，很多时候就看它用得对、护得好与否。做好正确使用和日常维护，才能让每一次分析数据都靠谱。

一、色谱柱使用说明

使用前注意

新色谱柱里的储存液，一般是出厂评价报告上指定的流动相。用之前先确认下，这储存液和你要用到的样品流动相能不能混溶，别直接混用出问题。要是反相色谱里，你用的洗脱剂是高浓度盐或者缓冲液，记得先换成 10% 低浓度有机相洗脱剂过渡下，这样能避免盐析堵了柱子。

流动相要求

配流动相建议用色谱纯的有机溶剂和超纯水，要是流动相里含盐，好过一下 0.45μm 的滤膜。流动相的容器和在线过滤器也得定期清洗，别让杂质堆积。常规的硅胶基质键合相填料，适合在 pH 2.0-8.0 的环境用；要是分析碱性化合物，选 BDS C18 填料更合适，它能耐受 pH 2.0-10.0 的范围。不过要是在 pH 临界值附近用了柱子，用完得赶紧用合适的溶剂清洗干净。

样品处理

样品得提前预处理，保证干净才行，比如用样品过滤器或者预处理柱（SPE）处理下。遇到难处理的样品，加个保护柱能少不少麻烦。另外，做正相色谱分析时，所有溶剂和样品都得严格脱水，不然会影响分析结果。

表 1：色谱柱使用关键要点

二、色谱柱保存方法

日常保养

每次用了缓冲液或者含盐的流动相后，先拿 10% 甲醇 / 水冲洗柱子 30 分钟，把盐分冲掉，之后再用纯甲醇冲洗 30 分钟。这里要注意，别用纯水直接冲，容易让填料塌陷，反而损坏柱子。

长期保存

不同类型的柱子，保存方式不一样：反相柱要泡在纯甲醇或者乙腈里；正相柱得放在脱水的纯正己烷中；离子交换柱则保存于含叠氮化钠的水溶液里。保存时记得把柱子原装的堵头堵好，放在室温环境下就行。

表 2：色谱柱保存规范

三、色谱柱再生处理

反相柱再生

按顺序用 20-30 倍柱体积的溶剂冲洗：先冲甲醇：水 = 10:90（V/V），再冲乙腈，接着冲异丙醇，后反过来按异丙醇、乙腈、甲醇：水的顺序再冲一遍。

正相柱再生

同样用 20-30 倍柱体积的溶剂依次冲洗：先正己烷，再异丙醇、二氯甲烷，后甲醇，之后反过来按甲醇、二氯甲烷、异丙醇、正己烷的顺序再冲。特别提醒，所有用到的溶剂都必须严格脱水，一点水分都不能有。

表 3：色谱柱再生流程

四、常见问题与解决方案

柱压异常升高

遇到柱压莫名升高，大概率是这几个原因，对应处理就行：

筛板堵塞：要么反冲色谱柱，要么把柱头拆下来超声清洗 —— 用 10% 稀硝酸超声 10 分钟，之后再用纯水超声 10 分钟。

填料污染：把柱头前端被污染的填料换掉就行。

盐结晶：先用 10% 甲醇 / 水冲洗，把结晶溶解掉，之后再换高浓度甲醇继续冲。

pH 不当：要是因为 pH 不合适导致固定相结构受损，这种情况通常很难恢复，只能平时多注意 pH 范围。

表 4：柱压异常升高问题处理

其实只要用对方法、做好维护，不仅能延长色谱柱的使用寿命，更能让每一次分析结果都稳定准确，少走不少实验弯路。